【关 键 词】 | 生物反应器 纳米 支架 共培养 肝细胞 |
【摘 要】 | 目的为体外生物人工肝支持系统构建一种新型的多层平板型生物人工肝细胞反应器,从而提高反应器中细胞的活性及功能。方法自主设计组装一种新型的多层平板型生物反应器,平板表面采用静电纺丝纺上一层壳聚糖纳米纤维膜,新鲜分离的原代猪肝细胞接种于纳米纤维支架表面,用培养液进行循环式培养。定期检测反应器中细胞的活性及功能,并观察细胞与纳米材料结合情况。结果反应器中的细胞能与纳米支架材料很好的结合,每12 h分泌的白蛋白的量维持在100~139μg,尿素合成量为5.11~7.76 mg/dl,而氯化铵清除率则保持在44~60μmol/h。培养过程中,仅有少量的酶(AST、LDH)漏出。结论初步构建的新型多层平板型生物反应器,符合生物人工肝基本的要求。其内培养的细胞能保持良好的活性,并具有相应的功能。 |