关键词：组织脱水机；应用；预防性保养
随着现代病理技术的发展，脱水 －透明－浸蜡等一系列的组织前期处理已不再需要人工操作，取而代之的是生物组织全自动脱水机备，它具有容量大、自动化程度高、环保无污染等诸多优点。机器带来的便捷同时也对操作人员提出更高的要求，越精密的仪器越需要我们仔细保养，尽量避免人为因素导致结果差异。由于故障出现大多数为非上班时间，长时间浸泡在高浓度乙醇中的组织会变硬发脆，抑或是长时间裸露在外的组织会干枯变形，上述情况均能造成组织的损坏，同时机器的维修和组织的补救均需要大量的时间。因此，良好的、专业的预防性保养维护，是我们日常工作的前提。安徽省立医院南区病理科自 2010年开始使用 Leica ASP300型全自动密闭式组织脱水机以来，也多次出现故障，笔者查阅了多篇文献并结合工作中的使用心得，着重从以下几个方面对脱水机进行保养维护，现报道如下。
1 试剂控制
1.1 试剂的更换周期试剂是否需要更换，应从标本量多少、使用时间长短、肉眼观察液体混浊度及是否混有石蜡、镜下观察细胞核与细胞质是否分界清楚及核质是否模糊等方面予以把握。以每日300个标本为例，福尔马林、乙醇及二甲苯一般每周更换1次，梯度乙醇只将第一缸低浓度乙醇废弃，将后面的乙醇依次前移，最后一缸无水乙醇更新，Leica ASP300型全自动密闭式组织脱水机按照乙醇浓度由低到高顺序前移，废弃的第一缸装上无水乙醇后自动成为最后一缸。二甲苯及浸蜡用的石蜡每2周更换1次，每次只将使用时间较长、较混浊的一缸废弃，重新装上新的二甲苯及石蜡。如果试剂由于某种原因混有石蜡，无论使用时间多短都应立即予以更换。另外，如果镜下出现细胞核质分界不清，应注意前面第一缸低浓度乙醇是否浓度过高，过高的乙醇会使组织蛋白质凝固，导致乙醇无法深入到组织内部，造成脱水处理不佳。在对上述问题综合评估基础上，我们应根据各自实际情况灵活设置更换周期，要既能保证组织的处理质量，又能最大限度的利用试剂，同时尽可能的减少废液对环境的污染。
1.2 试剂更换注意事项（1）每次换试剂时均要仔细看清试剂名称，因为许多盛放无水乙醇、95%乙醇、二甲苯以及福尔马林的试剂瓶外观一样，应避免混淆，最好是等一种换好后再换另一种，切莫混在一块，否则会产生极其严重的后果，譬如把福尔马林当无水乙醇使用后会使组织灰白发软，以致无法制片影响诊断。（2）试剂液面必须严格控制在最大值与最小值之间，刚换的试剂一般均会满足要求，但在使用过程中应予以动态的监控。①因为组织中含有的水分多在低浓度乙醇中脱去，特别是第一缸75%乙醇，工作中会经常发现75%乙醇用了几天后其试剂桶的液面上升，以致本来在最大值与最小值之间的液面超过最大值，从而导致脱水缸试剂排放受阻，产生故障。故一旦发现液面超过最大值，必须立即修正。②清洗用的二甲苯由于混入洗掉的石蜡及挥发等因素，有时会造成液面不足以覆盖检测探头而造成报警，要及时予以添足或更换。③石蜡使用过程中易消耗，要密切观察随时予以补充。另外，注意三道石蜡缸液面最好维持同一平面，不要悬殊太大。（3）避免杂质充斥在试剂瓶中，尤其第一缸福尔马林固定的碎组织容易残留其中，应每周更换一次以防堵塞管道。（4）乙醇的脱水能力较强，处理不当可硬化组织造成过度收缩。郑晖等［1］报道将第一缸乙醇倒掉，后面依次前移，但高浓度不断向低浓度替换会造成低浓度乙醇的浓度越来越高，其会使组织表面变硬，乙醇不能深入组织内部置换水分，造成脱水效果不理想。同时乙醇长期使用后大量的脂肪及蛋白质可能残存其中，也会影响部分组织内部水分的置换。对脱水的影响尤以大组织标本为甚，影响后续的切片及染色。故应按照传统前移方法更换试剂，我们应密切关注前面低浓度乙醇的浓度。（5）无水乙醇和二甲苯应间隔一、两天更换，否则同时更换会使组织块收缩过度，变硬发脆，导致组织染色后细胞核与细胞质界限不清。（6）所用石蜡熔点变化时需相应调整蜡缸设置温度，如所用石蜡熔点由56～58℃换成58～60℃时，相应的蜡缸温度设定应增加2℃，否则石蜡会呈固液混合状态，造成管道堵塞以致停机维修。（7）标本筐每次从第二缸二甲笨进入第一缸石蜡的时候也将少许二甲苯带入第一缸石蜡内，多次后会使第一缸石蜡内二甲苯量增多，可以利用石蜡和二甲苯沸点不同［2］（石蜡沸点＞300℃、二甲苯沸点约144℃），二甲苯易挥发的特点每天把盖子打开2 h，使二甲苯挥发出去（另外2缸石蜡用纸板盖上避免同时挥发）以延长石蜡使用时间，减少成本。需注意的是，如果石蜡中混入脂肪较多达不到浸蜡要求时应立即予以更换。（8）定期将残液瓶里废液倒掉，以免倒吸引起管道阻塞。
2 程序设定
气温较低时应使用加热功能，除石蜡外其余试剂缸的温度应设定为40℃，加热后标本固定所需时间可明显缩短，且效果更佳。组织脱水程序中2缸二甲苯一般每缸时间设定为45～60 min，浸泡时间不宜过长，否则会造成脱水后组织标本过脆。由于第一缸石蜡多为二甲苯和石蜡的混合液，组织标本在第一缸石蜡中停留时间不宜过长。有文献［3］报道标本在石蜡和二甲苯的混合液中浸泡 60 min以上会造成组织硬脆和镜下细胞收缩，改为 5 min则情况明显好转。设定程序［4］时应充分考虑时间、温度、压力以及试剂的种类及新旧程度等各项参数，各单位可根据实际情况设置，目的是保证各参数的合理性以达到最佳的脱水、透明及浸蜡效果。在一定范围内上述各项参数互为相关，即其中一个参数有变化时，别的参数可能也要适时作出调整，才能保证有良好的处理效果。譬如可以适当延长浸泡时间和（或）提高温度来弥补试剂陈旧的不足，抑或用取消压力和（或）降低温度来抵消延长时间的作用。值得注意的是，当其中一项参数变化过大超过一定范围时，调动其它参数也毫无意义。同样微小变化的各参数对处理效果并无太大影响，故而程序调动不必过于频繁。
3 设备清洁
3.1 脱水缸清洁（1）每次脱水程序后，应立即用卫生纸将脱水缸中处于熔融状态的蜡搽拭干净，既可以节省后续清洗程序中的二甲苯又可以避免一些细小的组织残渣滞留。（2）密闭式脱水机的脱水缸底部有一个过滤漏孔，组织前期处理过程中所有试剂均由漏孔抽入或排除组织处理槽，因此要定期将过滤器漏孔上附着的油脂及固体沉渣清除，以保障过滤网的通畅，切勿使之堵塞引起故障。（3）脱水缸上的缸盖密封圈可能会因为残留过多石蜡影响脱水缸密封性能，从而导致脱水缸漏气的故障。因此，我们要定期清除密封圈周围溢出的石蜡并用相关溶剂清洁密封圈。（4）脱水缸内侧探测头主要发挥检测试剂液面高低的作用，如果受到污染可能引起机器中途停止运行。因此，每次需在标本上机前搽拭干净以防故障出现。
3.2 标本框清洁组织脱水程序完成后的标本框、盖上常常黏附着不少石蜡，这些石蜡在下一轮的脱水程序中经过固定时的加温有可能溶化，从而进入脱水机的虹吸管道造成堵塞，引起各种试剂相互污染。故而每次程序运行完成后必须将标本框、盖放在烤箱内烤1 h。需注意的是，烤箱的温度应设定高于蜡的熔点，并在下面垫上一个托盘用以接收融化的石蜡。
3.3 管道及阀门清洁（1）组织处理过程中可能会有囊肿内的胶质、含脂肪组织的油脂及部分血迹等异物混于试剂中，当试剂途经管道时长期黏附于管道壁及阀门上。浸蜡时也有可能部分石蜡颗粒粘在其中，尤其注意的是试剂中的石蜡和脂肪的混合物更易造成管道阻塞（特别是在寒冷的冬天）。（2）当上述各类异物杂质黏附在4个空气转换阀（冷凝阀C、压力阀P、真空阀V、空气阀 A）里的一个或几个时，阀内异物将使转换阀无法正常运转，从而导致抽吸的真空压或压力不够。为尽量避免上述故障发生，我们要做到以下几点。（1）定期清洗管道及阀门，用2%的洗衣粉液和65℃的热水以及 95%乙醇清洗［5］。（2）采用干净的清洗液清洁脱水缸，避免把杂质和石蜡带到管道和试剂瓶内。（3）脱水、透明、浸蜡所用的试剂要干净，否则试剂中会产生脂肪和石蜡的混合物。（4）避免操作失误导致脱水缸内的石蜡流入公共管道，遇冷凝固的石蜡使管道发生堵塞。（5）管道阻塞可以用气流吹法、热水灌注法等处理管道堵塞，避免用细铁丝去直接捅管道，易造成管道被捅破。
3.4 试剂桶内壁清洁在混有脂肪、胶质及血迹等杂质的试剂桶内壁上也会附着许多异物，如不及时清除既会降低试剂纯度也有可能脱落后形成栓子随试剂运行到管道或阀门上，导致管道堵塞或阀门失灵。因此，每次更换试剂时，务必用热水冲洗试剂桶内壁的油脂等杂物。
4 其它
每个标本框的最大容量为100个标本，否则组织间相互挤压可能会引起脱水的液体不能充分浸没全部标本，以致液体交换不足造成组织处理不良。避免重复开关机，否则可能会导致硬盘损坏或文件丢失无法还原，也有可能会导致触摸屏黑屏或蓝屏。活性炭用久后可取出放于干燥箱内烘干或放置通风干燥处一段时间后继续使用。机器的散热风扇及电路板上易吸附灰尘，不定期清除灰尘可能会引起散热不良，从而影响设备运行。因此，需要把脱水机放置在光线、通风均良好的地方并定期除尘，以延长机器使用的寿命。
